朝鲜农村到底有多穷:肽链的推断问题?请大侠帮忙!!

来源:百度文库 编辑:中科新闻网 时间:2024/04/29 20:29:26
有一个肽,用胰蛋白酶水解得:A:Met-Glu-Leu-Lys;B:Ser-Ala-Arg;C:Gly-Tyr三段片段,用BrCN处理得:D:Ser-Ala-Arg-Met;E:Glu-Leu-Lys-Gly-Tyr两组片段,按肽谱重叠法推导出该九肽的序列?
请高手写写推断的步骤,方法,思路及其结果!
十分感谢!
急!
写肽链顺序时不用考虑N端或C端吗?

首先,写肽链顺序时必须指出C端、N端。
测序步骤:
1.因为胰蛋白酶只断裂Lys或Arg残基的羧基参与形成的肽键,所以用它断裂多肽链得到的是以Arg和Lys为C-末端残基的肽段, 所以肯定上述C 片断 肯定是这个9肽的C端
2.而溴化氢只断裂Met残基的羧基参与形成的肽键,

根据 以上分析,得出C-末端是: Tyr
借助重叠肽原理 得出两套肽段的大致排列:

第一套:Ser-Ala-Arg Met-Glu-Lue-Lys Gly-Tyr
第二套:Ser-Ala-Arg-Met Glu-Leu-Lys-Gly-Tyr

推断此9肽的全序列为:N-Ser-Ala-Arg-Met-Glu-Leu-Lys-Gly-Tyr-C

(其实,这道题只要知道胰蛋白酶的断裂点,结合两套肽段,就可以直接的、一目了然的看出9肽的N、C末端和 全序列,不需要这么复杂的过程。不过,不知道断裂点就得用两组片断进行重叠法推测。)

重叠法的原理就是分别用不同的方法处理需要测定的肽,得到从不同部位断裂的片段,然后根据起重复序列的位置推断出原来各肽的序列。
方法:就是按照对应的方法将相同的部位重叠起来,最后取其长者得到总体序列:
..................Met-Glu-Leu-Lys
........................Glu-Leu-Lys-Gly-Tyr
Ser-Ala-Arg-Met
Ser-Ala-Arg
......................................Gly-Tyr
经过上面的重叠之后,取最长者,就可以得到答案:
该九肽的序列为:Ser-Ala-Arg-Met-Glu-Leu-Lys-Gly-Tyr